পারমাণবিক চুম্বকীয় অনুরণন (NMR) রাসায়নিক যৌগ, বিশেষ করে জৈব পদার্থ সনাক্ত করার জন্য বহুল ব্যবহৃত একটি পদ্ধতি। এটি পারমাণবিক স্পিনের নীতির উপর নির্ভর করে; যখন একটি পরমাণুর নিউক্লিয়াস একটি শক্তিশালী চৌম্বকক্ষেত্রে স্থাপন করা হয়, তখন তার চৌম্বক ক্ষেত্রটি ক্ষেত্রের দিকের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ হয়। যখন রেডিও তরঙ্গ আকারে শক্তি প্রয়োগ করা হয়, তখন কিছু নিউক্লিয়াস ক্ষেত্রের বিরুদ্ধে ঘুরতে থাকে। স্পেকট্রোমিটার নির্গত শক্তিকে পরিমাপ করে যখন নিউক্লিয়াস ক্ষেত্রের সাথে ঘুরতে ফিরে যায়। এই তথ্য থেকে অনেক কাঠামোগত তথ্য পাওয়া যেতে পারে।
ধাপ
2 এর অংশ 1: নমুনা প্রস্তুত করা
ধাপ 1. নমুনা শুকিয়ে নিন।
যদি আপনার নমুনায় দ্রাবক থাকে, দ্রাবক শিখরগুলি NMR বর্ণালীতে খুব দৃ show়ভাবে প্রদর্শিত হবে এবং আপনি যে শিখরগুলি দেখতে চান তাতে হস্তক্ষেপ করতে পারে। যৌগটি শুকানো কতটা সহজ তা নির্ভর করে, তবে রাতারাতি এটিকে ভ্যাকুয়ামের নিচে রেখে দিলে সাধারণত সর্বাধিক সাধারণ জৈব দ্রাবক দূর হয়ে যায়।
পদক্ষেপ 2. একটি উপযুক্ত দ্রাবক চয়ন করুন।
যৌগের প্রায় 10-20 মিলিগ্রাম নিন এবং এটি ব্যবহার করতে চান এমন দ্রাবকের একটি অ-বিকৃত সংস্করণে দ্রবীভূত করুন। বেশিরভাগ এনএমআর বর্ণালী ক্লোরোফর্মে চালিত হয়, তাই এটি দিয়ে শুরু করুন। যদি আপনার খুব মেরু যৌগ থাকে, তাহলে আপনি DMSO, এসিটোন, এসিটোনাইট্রাইল, বা জল ব্যবহার করতে পারেন।
ধাপ 3. আপনার নমুনা প্রস্তুত করুন।
একটি ছোট টেস্ট টিউবে প্রায় 10-20 মিলিগ্রাম যৌগের ওজন, এবং উপযুক্ত দ্রাবকের বিকৃত সংস্করণের প্রায় 0.75 এমএল যোগ করুন।
সবকিছু সমাধানের মধ্যে যেতে হবে। যদি অমীমাংসিত কঠিন পদার্থ থাকে, তাহলে নিম্নমানের বর্ণালী হবে।
ধাপ 4. একটি NMR টিউবে নমুনা োকান।
একটি NMR টিউব হল একটি নল, প্রায় 25 সেমি লম্বা এবং 0.5 সেমি চওড়া, (সাধারণত) বোরোসিলিকেট কাচ দিয়ে তৈরি। আপনার নমুনার সমাধান নিন, এটি একটি পাস্তুর পাইপেট ব্যবহার করে সংগ্রহ করুন এবং NMR টিউবে োকান। প্লাস্টিকের ক্যাপ ব্যবহার করে টিউবটি সিল করুন।
NMR টিউবে তরলের উচ্চতা তিন আঙ্গুল লম্বা হতে হবে। আপনার চতুর্থ, তৃতীয় এবং দ্বিতীয় আঙ্গুলগুলি টিউবের নীচে ধরে রাখুন। যদি আপনি তাদের উপরে তরলের উপরের অংশটি দেখতে না পান তবে একটু অতিরিক্ত দ্রাবক যোগ করুন।
2 এর অংশ 2: নমুনা চালানো
পদক্ষেপ 1. নিরাপত্তা সতর্কতা জানুন।
একটি NMR চালানো খুব বিপজ্জনক নয়, এটি শক্তিশালী চৌম্বকীয় ক্ষেত্রের চারপাশে থাকা জড়িত।
- আপনি যদি পেসমেকার বা ম্যাগনেটিক ইমপ্লান্ট পরেন, তাহলে NMR স্পেকট্রোমিটারের আশেপাশের মেঝেতে লাল বা হলুদ বৃত্ত প্রবেশ করবেন না। এগুলি স্পেকট্রোমিটারের চারপাশে মেঝেতে টেপ করা লাইন। তারা 5 গাউস এবং 10 গাউস লাইনের সূচনা করে।
- আপনার নমুনা beforeোকানোর আগে আপনার পকেট থেকে যেকোনো চৌম্বকীয় আইটেম যেমন ক্রেডিট কার্ড বা ঘড়ি সরিয়ে ফেলুন।
ধাপ 2. একটি স্পিনারে আপনার টিউব োকান।
এটি একটি প্লাস্টিকের কলার যা চুম্বকের ভিতরে আপনার NMR টিউবকে সমর্থন করে। টিউবের শেষটি ব্যবহার করে একটি স্পিনার তুলুন এবং টিপুন যতক্ষণ না স্পিনারের নীচের অংশটি টিউবের নীচে 10 সেমি উপরে থাকে।
ধাপ 3. টিউবের বাইরের অংশ পরিষ্কার করুন।
Isopropanol, acetone, বা অন্য একটি উদ্বায়ী জৈব দ্রাবক ব্যবহার করুন, এবং একটি টিস্যু/Kimwipe ভেজা। যে কোনো দূষণ দূর করতে টিউবের বাইরে, স্পিনারের নিচে মুছুন।
ধাপ 4. স্পেকট্রোমিটারে লিফট এয়ার চালু করুন।
যখন বাতাস উপরের দিকে ছুটতে শুরু করে, চুম্বকের উপরে আপনার নমুনা োকান।
ধাপ 5. NMR টিউব োকান।
লিফট বাতাসের প্রবাহ বন্ধ করুন যাতে নমুনাটি আলতো করে চুম্বকে নেমে আসে।
ধাপ 6. বর্ণালী লক করুন।
উপযুক্ত deuterated দ্রাবক চয়ন করুন, এবং "লক" বোতাম টিপুন। এটি স্পেকট্রোমিটারকে বলে যে আপনি কোন দ্রাবক ব্যবহার করছেন।
ধাপ 7. বর্ণালী পরিমাপ করুন।
এটি চুম্বক ক্ষেত্রের একজাতীয়তার জন্য ক্ষতিপূরণ দেয় (মূলত, এটি একটি সামঞ্জস্যপূর্ণ চৌম্বক ক্ষেত্রে সমগ্র নমুনা নিশ্চিত করে)। মেশিনটি শেষ হওয়ার জন্য অপেক্ষা করুন।
ধাপ 8. আপনি যে পরীক্ষাটি করতে চান তার ধরন, নাম এবং শিরোনাম নির্বাচন করুন।
- আপনার নমুনার নাম আসলেই কোন ব্যাপার না, তবে শুধু জানুন এটা কি তাই আপনি সহজেই আপনার ডেটা খুঁজে পেতে পারেন।
- পরীক্ষার ধরন নির্ভর করে আপনি কোন নিউক্লিয়াস স্ক্যান করতে চান। বেশিরভাগ জৈব অণুতে প্রোটন থাকে, তাই 1 ডি প্রোটন এনএমআর সবচেয়ে সাধারণ। যদি ফসফরাস বা ফ্লোরিন থাকে, সেগুলোতেও NMR করুন। কার্বন -১ N এনএমআর অন্য তিনটির চেয়ে বেশি সময় নেয়, এবং সাধারণত কেবল তখনই প্রয়োজন হয় যখন আপনাকে আপনার প্রশিক্ষকের দ্বারা এটি করতে বলা হয়, অথবা আপনি যদি এমন একটি যৌগের বৈশিষ্ট্য করেন যা সাহিত্যে পরিচিত নয়।
- আপনি যদি 2D NMR চালাতে চাইতে পারেন যদি আপনার যৌগটি অত্যন্ত জটিল হয়, অথবা 1D NMR আপনাকে পর্যাপ্তভাবে সনাক্ত করতে সাহায্য না করে।
ধাপ 9. স্ক্যানের সংখ্যা নির্ধারণ করুন।
16 প্রোটন, ফ্লোরিন এবং ফসফরাস এনএমআর এর জন্য প্রচুর। পর্যাপ্ত সংকেত থেকে শব্দ অনুপাতের জন্য কার্বন এনএমআর 500 বা তার বেশি প্রয়োজন হতে পারে।
ধাপ 10. শিথিলকরণ বিলম্ব সেট করুন।
স্পেকট্রোমিটারের দ্বারা নির্ধারিত ডিফল্ট নির্ভর করবে আপনি কোন নিউক্লিয়াসকে বেছে নিয়েছেন তার উপর, কিন্তু আপনি যদি 13C NMR- এ কার্বনিলগুলি কমপক্ষে 2.0 সেকেন্ডে পর্যবেক্ষণ করার চেষ্টা করছেন, সম্ভবত 5.0 সেকেন্ড পর্যন্ত এটিকে বাড়ানোর ইচ্ছা থাকতে পারে।
ধাপ 11. প্রয়োজনে সুইপ প্রস্থ এবং বর্ণালীর মাঝখানে সেট করুন।
এগুলি সাধারণত একা থাকতে পারে যদি না আপনি প্যারাম্যাগনেটিক অণুগুলির সাথে কাজ করেন যা অস্বাভাবিক রাসায়নিক পরিবর্তনের বৈশিষ্ট্যযুক্ত।
ধাপ 12. প্রোব টিউন করুন।
এটি আপনার পছন্দের স্টেশনটি শোনার জন্য একটি পুরানো দিনের রেডিও টিউন করার মতো। মেশিন শেষ হওয়ার জন্য অপেক্ষা করুন।
ধাপ 13. পরীক্ষা শুরু করুন।
আপনার বর্ণালীতে শিখরগুলি প্রদর্শিত হয় তা দেখুন। একবার আপনি নয়েজ রেশিওতে সন্তোষজনক সংকেত দেখলে, আপনি পরীক্ষাটি বন্ধ করতে পারেন, অথবা অনুরোধকৃত স্ক্যানের সংখ্যা শেষ হওয়ার জন্য অপেক্ষা করতে পারেন।
ধাপ 14. প্রতিটি অতিরিক্ত নিউক্লিয়াসের স্ক্যানিং প্রক্রিয়া পুনরাবৃত্তি করুন যা আপনি স্ক্যান করতে চান।
যতক্ষণ না আপনার নমুনা পরিবর্তন না হয় ততক্ষণ স্পেকট্রোমিটার লক বা শিম করার দরকার নেই।
ধাপ 15. নমুনা বের করুন।
লিফট এয়ার চালু করুন, এবং স্পেকট্রোমিটার থেকে নমুনা বের হওয়ার জন্য অপেক্ষা করুন। এটি তুলুন এবং লিফটের বাতাস বন্ধ করুন।
ধাপ 16. স্পিনার সরান।
একটি Kimwipe নিন এবং এটি টানুন। যেখানে আপনি এটি খুঁজে পেয়েছেন সেখানে স্পিনারকে রাখুন।
ধাপ 17. আপনার বর্ণালী ব্যাখ্যা করুন।
একটি প্রোটন NMR এর জন্য, আপনার NMR টিউবের ভিতরে আসলে কি আছে তা বের করার টিপসগুলির জন্য একটি প্রোটন নিউক্লিয়ার ম্যাগনেটিক রেজোন্যান্স স্পেকট্রামের ব্যাখ্যা কিভাবে করবেন তা পরীক্ষা করুন।
পরামর্শ
যদি আপনি দ্রাবক পরিবর্তন না করেন, তাহলে আপনাকে নমুনার মধ্যে স্পেকট্রোমিটার লক করতে হবে না। যাইহোক আপনি এখনও shim করা উচিত।
সতর্কবাণী
- ডিউরেটেড দ্রাবক, বিশেষ করে ক্লোরোফর্ম বিষাক্ত হতে পারে। নমুনা প্রস্তুত করার সময় একটি ফিউম হুডে কাজ করুন।
- স্পিনার whenোকানোর সময় সতর্ক থাকুন। সোজা নিচে টিপুন, অন্যথায়, নলটি ভেঙ্গে আপনার হাত কেটে ফেলতে পারে।
- বেশিরভাগ ক্ষেত্রে, অ-বিকৃত দ্রাবকগুলিতে বর্ণালী চালানোর চেষ্টা করবেন না। আপনার দ্রাবক শিখর এত উঁচু হবে যে আপনার যৌগ থেকে কোন চূড়া দেখা খুব কঠিন হবে।
